一、綜合安全等級評價方法概述

　　綜合安全等級評價方法是對水產苗種檢疫內容中感官要求、寄生蟲性疾病和細菌性疾病的檢疫結果進行判定的方法。主要運用模糊數(shù)學的基本理論，將各隸屬項進行模糊量化，按三種檢測結果分別賦予1、2、4的分值，然后將各隸屬項的分值進行相加，計算出系統(tǒng)綜合評分，根據系統(tǒng)綜合評分的分值來判斷系統(tǒng)的綜合安全等級。

　　二、水產苗種檢疫結果評分標準

　　1、感官要求共包含五項指標：

　　a、活力  b、感光能力  c、體表光潔度  d、傷殘、畸形率  e、死亡率

　　各項指標的判定結果

　　感官要求評分標準：

　�、傥屙椫笜酥腥�部指標符合要求或僅有一項指標未符合要求，則將其評分結果記為1；

　　②五項指標中其中有兩項或三項指標未符合要求，則將其評分結果記為2；

　�、畚屙椫笜酥衅渲杏兴捻椈蛉�部指標未符合要求，則將其評分結果記為4.

　　2、寄生蟲檢測包括對寄生蟲數(shù)量的判定及其優(yōu)勢種類別的鑒定，評分標準為：

　�、俳M織內（外）偶見寄生蟲，則將其評分結果記為1；

　�、诮M織內（外）容易發(fā)現(xiàn)寄生蟲，但寄生蟲數(shù)量較少，則將其評分結果記為2；

　�、劢M織內（外）極易發(fā)現(xiàn)寄生蟲，且寄生蟲數(shù)量很多，則將其評分結果記為4；

　　3、細菌檢測包括對弧菌數(shù)量的測定及其優(yōu)勢菌種類的鑒定，以下為弧菌總數(shù)標準化檢測程序及評分標準：

　�。�1）弧菌總數(shù)標準化檢測程序

　�、贅颖咎幚恚�

　　將初樣（混合樣）放入初樣管中，用無菌扦樣器搗碎樣本制成實驗樣本。

　　②母液及稀釋液的制備：

　　用扦樣器扦取0.5g（0.5ml）實驗樣本于母液管（內含4.5ml Nacl溶液）中，制成母液，并振蕩混勻，此時母液管濃度級別為10-1.用微量移液器吸取母液管中的液體0.5ml，注入A管（內含4.5ml Nacl溶液）配成濃度級別為10-2的稀釋液，并振蕩混勻。

　　以此類推，制成B管10-3稀釋液和C管10-4的稀釋液。

　�、奂毦�接種及培養(yǎng)：

　　用無菌微量移液器分別吸取ABC管中的稀釋液，向特定選擇性培養(yǎng)基TCBS上滴1滴溶液（0.05ml），并做平行對照組，微微搖晃使液體盡量散開，待液體完全被培養(yǎng)及吸收后，放于25-28℃倒置培養(yǎng)36-48小時后取出計數(shù)。

　�、芗毦�總數(shù)計數(shù)及計算均值無論細菌菌落大小均要求計數(shù)，經計算得每個濃度的計數(shù)平均值分別用ABC來表示。

　　⑤結果判定原則：

　　a、首先選擇平均菌落在20~200之間的數(shù)值作為檢測結果，如果只有一項數(shù)值介于20~200之間，則選擇該數(shù)值為最終結果，即若A屬于[20，200]，BC不屬于[20，200]，則A為最終結果；

　　b、如果有兩項數(shù)值介于20~200之間，則按以下原則：

　　AB屬于[20~200]，C小于20，則選B為最終結果；

　　BC屬于[20，200]，A大于200，則選C為最終結果。

　　c、如果ABC均大于200，則選C為最終結果，如果ABC均小于20，則選A為最終結果。

　　d、可以接受的結果：

　　如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此兩種結果可由多種原因導致，需比較實驗組和對照平行組來判定是否屬于上述幾種情況，如果認為結果不能更改，則可選擇B為最終結果，B為可接受結果。

　　e、如果除了上述的這些情況外，還出現(xiàn)了其它的結果，則說明實驗過程中存在嚴重的錯誤，應當重新實驗。

　　（2）評分標準：

　�、倩【�總數(shù)計數(shù)的最終結果若選擇A為最終檢測結果的記為1；

　　②弧菌總數(shù)計數(shù)的最終結果若選擇B為最終檢測結果的記為2；

　�、刍【�總數(shù)計數(shù)的最終結果若選擇C為最終檢測結果的記為4；

　　三、安全等級的劃分

　　安全等級分成五個等級，具體如下：

　　綜合安全等級評分表

　　四、等級提升及等級提升原則

　　1、等級提升原理及概念：

　　由于不同致病性細菌或寄生蟲對不同生物體造成的危害程度不同，所以每類生物體都有其專屬的致病性細菌或寄生蟲病，為了更好地體現(xiàn)這種差異性，也為了更準確地出具綜合安全等級評價結果，于是引入等級提升的概念：在細菌檢測或寄生蟲檢測中，如果處于優(yōu)勢生長的細菌或寄生蟲，恰好為該品種主要細菌病或寄生蟲病中的致病性細菌或寄生蟲，則需進行等級提升。

　　2、等級提升原則：

　　①范圍及條件：當細菌檢測和寄生蟲檢測中的最終判定結果最高級，即評分為4的時候，并且所鑒定的優(yōu)勢菌（種）種類為該樣本所列的致病性病源菌（種），則需進行等級提升；

　�、谙到y(tǒng)等級提升：在系統(tǒng)綜合評分后，將系統(tǒng)的綜合安全等級向危險等級方向提升一個等級，即如果系統(tǒng)綜合評分為7，系統(tǒng)綜合安全等級為一般安全等級，則經過提升后，系統(tǒng)綜合安全等級為比較危險等級。